小鼠胚胎成纖維細胞MEF

簡要描述：青旗（上海）生物技術發展有限公司，總部位于上海浦東新區，依托本地高校資源，逐步發展成為以生物技術為主的研發、生產、培訓為一體的綜合化產業平臺，在標準化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產經營原代細胞、細胞系、ELISA試劑盒、感受態細胞和HPLC檢測等科研產品與服務。我們秉承對用戶負責的態度，以對科研的高度嚴謹，以嚴格的質量控制，為廣大生物醫學科研用戶提供更優質的服務！

更新時間：2021-05-28

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詳情介紹

品牌	其他品牌	貨號	BFN608006389
規格	T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2	供貨周期	現貨
主要用途	僅供科研	應用領域	醫療衛生,生物產業

細胞名稱	小鼠胚胎成纖維細胞MEF
貨物編碼	BFN608006389
產品規格	T25培養瓶x1	1.5ml凍存管x2
細胞數量	1x10^6	1x10^6
保存溫度	37℃	-198℃
運輸方式	常溫保溫運輸	干冰運輸
安全等級	1
用途限制	僅供科研用途 1類

培養體系	DMEM高糖培養基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone）
培養溫度	37℃	二氧化碳濃度	5%
簡介	小鼠胚胎成纖維細胞MEF細胞取孕9天的615小鼠胚胎，去除腦、心臟等培養建立。該細胞可用作飼養層細胞，支持胚胎干細胞ES的生長并維持ES未分化的狀態。當作為飼養層細胞時，MEF需經C處理停止生長。建議作為ES細胞的飼養層時，MEF不要超過6代。
注釋	Mus musculus (Mouse) (NCBI Taxonomy: 10090) Breed/subspecies: C57BL/6.
STR信息	/
參考文獻	Caputo, J. L., Biosafety procedures in cell culture. J. Tissue Culture Methods 11:223-227, 1988. Hay RJ, Caputo JL, Macy, ML, Eds. (1992) ATCC Quality Control Methods for Cell Lines. 2nd edition, Published by ATCC. Fleming, D.O., Richardson, J. H., Tulis, J.J. and Vesley, D., (1995) Laboratory Safety: Principles and Practice. Second edition, ASM press, Washington, DC. Freshney RI. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique, 5th edition. New York: Wiley Liss; 2005. For more information on enzymatic dissociation and subculturing of cell lines see Chapter 13. Nagy A, et al. Manipulating The Mouse Embryo: A Laboratory Manual. Third Edition: Cold Spring Harbor Press; 2003.

驗收細胞注意事項

1、收到小鼠胚胎成纖維細胞MEF細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。

2、收到小鼠胚胎成纖維細胞MEF細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

3、收到小鼠胚胎成纖維細胞MEF細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到 15％去培養。若細胞迏到 80%左右，血清濃度還是在 10％。

4、收到小鼠胚胎成纖維細胞MEF細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML 培養基繼續培養：超過 80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。

5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。

6、24 小時后，小鼠胚胎成纖維細胞MEF細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。

特別提醒： 原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。

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